熒游標記細胞株分離與培養要求
點選次數│✘：359 釋出時間│✘：2022-01-14
熒游標記細胞株使用注意事項│✘：
1·₪、懸浮細胞用此法時必須經離心後才能吸出上清再加DMSO₪│。
2·₪、Formazan 的生成不僅與活細胞數成比例◕☁，也受作用時間的影響◕☁，因此當樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變₪│。
3·₪、MTT 溶液為黃色◕☁，需避光儲存◕☁，長時間光照會導致失效₪│。當顏色變為灰綠色時◕☁，請勿使用₪│。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固◕☁，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解後使用₪│。
4·₪、為了您的安全和健康◕☁，請穿實驗服並戴一次性手套操作₪│。
熒游標記細胞株分離與培養│✘：
1·₪、無菌條件下◕☁，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織◕☁，然後用PBS將此組織塊清洗2次◕☁，後將組織剪成1mm3左右大小；
2·₪、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）◕☁，混懸10s◕☁，置37℃條件下消化10min◕☁，之後用滴管吹打製成單細胞懸液◕☁，自然沉澱並收集上清◕☁，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置；
3·₪、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液◕☁，混懸10s◕☁，置37℃消化10 min後◕☁，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置◕☁，重複此步驟2-3次◕☁，直至組織完全被消化；
4·₪、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液◕☁，1200r/min 離心10min◕☁，棄去上清◕☁，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸◕☁，接種於25cm2培養瓶◕☁，放置於37℃ ◕☁，5％CO2 培養箱中培養；
5·₪、差速貼壁1h後◕☁，吸出培養基◕☁，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養；
